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    Silica硅膠色譜柱的維護(hù)與使用

    為獲得最長的柱壽命，應(yīng)避免使用不互溶的或有害的流動(dòng)相。在選擇和配制流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)考慮下面幾點(diǎn)：

    1、決不要用不相溶的溶劑依次通過色譜柱。

    確保即將泵入柱中的溶劑及目前在柱中的溶劑*相溶，否則必須泵入一種或多種互溶的中間溶劑于柱中，以免產(chǎn)生高壓。

    2、在流動(dòng)相中只用純?nèi)軇?br />
    制備流動(dòng)相時(shí)，必須用高純(HPLC級(jí))溶劑。緩沖鹽及離子對試劑中存在的痕量污染物在其它應(yīng)用中可能不會(huì)產(chǎn)生問題，但若用于HPLC流動(dòng)相中，則會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的結(jié)果。使用不純流動(dòng)相會(huì)產(chǎn)生基線漂移或出現(xiàn)污染峰，特別是采用梯度洗脫時(shí)。痕量雜質(zhì)也會(huì)吸附于柱頭上，導(dǎo)致分辨率下降及柱壽命縮短。所有溶劑使用前都必須過濾并脫氣。

    3、注意一旦加入有機(jī)溶劑時(shí)緩沖溶液可能出現(xiàn)沉淀。

    當(dāng)在流動(dòng)相中使用緩沖液、離子對試劑或其它鹽時(shí)，應(yīng)注意有機(jī)物含量增加時(shí)會(huì)出現(xiàn)沉淀。

    4、不要使用能與鍵臺(tái)相或硅膠發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的流動(dòng)相。

    大多數(shù)情況下，HPLC中使用的鍵合相相當(dāng)穩(wěn)定，一般而言，硅氧鍵將官能團(tuán)鍵合至硅膠粒上，強(qiáng)酸條件下可能會(huì)出現(xiàn)硅氧鍵的水解，故流動(dòng)相的PH值應(yīng)保持在2.0(注意：有些色譜柱耐受限可達(dá)PH1.0)以上。若必要，也可用到PH2以下，但柱壽命將會(huì)縮短.